Reazzjoni Ksantoproteinovaya għal proteina: sinjali u ekwazzjoni formula

Sabiex jiġi stabbilit l-kompożizzjoni kwalitattiva ta 'ħafna ikel użati reazzjoni ksantoproteinovaya mal-proteina. Il-preżenza ta 'aċidi amino aromatiċi fit-taħlita se jinbidlu fil-kulur pożittiv kampjun tat-test.

X'inhu proteina

Huwa sejjaħ ukoll proteina, li huwa materjal tal-bini għall-korp għajxien. Proteini iżommu daqs tal-muskoli, jirrestawraw l-istrutturi tat-tessut feruti u mejta ta 'organi varji, kemm jekk tkun xagħar, ġilda u ligamenti. Bil-parteċipazzjoni tagħhom, tipproduċi corpuscles ħomor tad-demm, hija rregolata mill-operazzjoni normali ta 'ħafna ormoni u ċelloli tas-sistema immuni.

Dan huwa molekula kumpless li huwa polipeptid li għandhom massa akbar minn 6 ~ 10 ³ dalton. istruttura proteina li jifforma residwi aċidu amino f'numru kbir ta 'bond peptide flimkien.

L-istruttura ta 'proteini

Il-karatteristika distintiva ta 'dawn is-sustanzi meta mqabbla ma' peptidi piż molekulari baxx huwa li dawn żviluppaw struttura spazjali tridimensjonali, l-effetti bi gradi varji ta 'attrazzjoni appoġġjati. Proteini jkollu erba 'struttura. Għal kull waħda minnhom għandha l-karatteristiċi tiegħu stess.

Billi l-bażi ta 'l-organizzazzjoni primarja tal-molekuli derivati sekwenza amino aċidi, l-istruttura li jirrikonoxxi reazzjoni ksantoproteinovaya mal-proteina. Din l-istruttura hija perjodikament tirrepeti bond peptide -HN-CH-KOOPERAZZJONI, ta 'radikali parti selettivi huma l-ktajjen tal-ġenb fil aċidi amino. Huma jiddefinixxu proprjetajiet oħra tas-sustanza kollha kemm hi.

L-istruttura proteina primarja hija kkunsidrata b'saħħtu biżżejjed, dan huwa minħabba l-preżenza ta 'interazzjonijiet kovalenti qawwija fil-bonds peptide. Il-formazzjoni ta 'livelli sussegwenti iseħħ jiddependi fuq l-attributi previsti fl-istadju inizjali.

Il-formazzjoni tal-istruttura sekondarju huwa possibbli minħabba brim tas-sekwenza aċidu amminiku b'mod spirali, f'liema bonds idroġenu huma stabbiliti bejn id-dawriet.

organizzazzjoni livell terzjarju ta 'molekoli ffurmati billi jiġi applikat wieħed mill spirali fuq il-frak oħra bl-okkorrenza ta' konnessjonijiet kollha possibbli bejniethom, bl-idroġenu, disulfide, kovalenti jew kompost mhux ijoniċi. Ir-riżultat huwa l-assoċjazzjoni fil-forma ta 'globuli.

L-arranġament spazjali tal-istrutturi terzjarji mal-formazzjoni ta 'bonds kimiċi bejniethom iwassal għall-formazzjoni tal-forma finali tal-molekula jew livelli kwaternarju.

amino aċidi

Dawn jikkawżaw l-proprjetajiet kimiċi ta 'proteini. Hemm madwar 20 aċidi amino ewlenin li jiffurmaw l-polipeptidi f'sekwenza differenti. Dan l-aċtu aminocarboxylic rari wkoll hija msemmija fil-forma hydroxyproline u hydroxylysine derivati peptide bażiku.

Bħala sinjal ta 'reazzjoni proteina ksantoproteinovaya rikonoxximent, il-preżenza ta' ċerti aċidi amino jipprovdi l-bidla fil-kulur ta 'reaġenti, li jissuġġerixxi l-preżenza ta' strutturi speċifiċi fil-kompożizzjoni tagħhom.

Peress li rriżulta, huma aċidi karboksiliċi li seħħew sostituzzjoni ta 'atomu idroġenu fuq il-grupp ta' ammini.

Struttura Eżempju tal-molekula jista 'jservi formula strutturali gliċina (HNH- HCH- COOH) bħala l-aċidu amino sempliċi.

F'dan il-każ wieħed mill-idroġeni CH ₂ - jista 'jiġi sostitwit minn karbonju itwal radikali li tinkludi ċirku benżina, amino, sulfo, carboxy.

Xi jfisser reazzjoni ksantoproteinovaya

Għall-analiżi kwalitattiva ta 'proteini permezz ta' tekniki varji. Dawn jinkludu reazzjonijiet:

• bjuret mad-dehra ta 'kulur vjola;
• ninhydrin biex jiffurmaw soluzzjoni blu-vjola;
• formaldehyde bl-istabbiliment ta 'kulur aħmar;
• Nogier biex tippreċipita l-kulur griż iswed.

Fit-twettiq ta 'kull metodu wera l-preżenza ta' proteini u l-preżenza ta 'ċerti gruppi funzjonali fil molekula tagħhom.

Hemm ksantoproteinovaya reazzjoni għall-proteina. Huwa sejjaħ ukoll l-analiżi Mulder. Hija tirreferi għall-reazzjonijiet kulur għall-proteini, fejn hemm aċidi amino aromatiċi u eteroċikliċi.

Karatteristika ta 'tali proċess kampjun tkun nitrati aċidu nitriku residwi ċikliku amino aċidu b'mod partikolari l-adeżjoni tal-grupp nitro għall-ċirku benżina.

Ir-riżultat ta 'dan il-proċess huwa l-formazzjoni ta' komposti nitro, li preċipitati. Dan huwa r-reazzjoni bażiku karatteristika ksantoproteinovaya.

Liema determinat l-aċidu amminiku

Mhux aċidu aminocarboxylic kollha jistgħu jiġu skoperti jużaw tali kampjun. Il-karatteristika prinċipali ta 'reazzjoni iskoperta proteina ksantoproteinovaya - il-preżenza taċ-ċirku benżina jew ċirku eteroċikliċi fil-aċidi amino molekula.

Minħabba li l-proteina huwa iżolat minn aċidi aminocarboxylic żewġ aromatiċi, fejn ikun hemm grupp fenil (għall phenylalanine), u hydroxyphenyl radikali (fil tyrosine).

B'reazzjoni ksantoproteinovaya huwa determinat eteroċikliċi aċidu amminiku tryptophan, indole jkollhom nukleu aromatiku. Il-preżenza tal-komposti ta 'hawn fuq fil-proteina tagħti l-bidla fil-kulur karatteristiku ta' l-ambjent tat-test.

Liema reaġenti użu

Għat-twettiq r-reazzjoni ksantoproteinovaya bżonn biex ħejji soluzzjoni 1% ta 'proteina tal-bajd, jew oriġini veġetali.

Normalment użati bajd, li hija maqsuma għas-separazzjoni ulterjuri tal-proteini mill-isfar. Għal soluzzjoni 1% ta 'proteina ġie dilwit fl-ammont b'għaxar darbiet ta' ilma ppurifikat. Wara x-xoljiment tal-likwidu proteina li tirriżulta għandha tkun iffiltrata permezz ta 'diversi saffi ta' cheesecloth. Din is-soluzzjoni għandha tiġi maħżuna f'post frisk.

Huwa possibbli li issir ir-reazzjoni ma 'proteina veġetali. Biex tipprepara s-soluzzjoni hija wżata dqiq tal-qamħ f'ammont ta 0.04 kg. 0.16 l ta 'ilma ppurifikat. L-ingredjenti kienu mħallta fi flask li huwa marbut għal 24 siegħa f'post frisk f'temperatura ta 'madwar + 1 ° C Fl-aħħar tal-ġurnata is-soluzzjoni kienet mħawwda, segwit b'filtrazzjoni tiegħu ewwel bit-tajjar u mbagħad - karta mitwija filtru. Il-likwidu li jirriżulta kien miżmum f'post frisk. Din is-soluzzjoni hija prinċipalment preżenti fil-frazzjoni albumina.

Għat-twettiq tal ksantoproteinovaya reazzjoni bħala l-reaġent użat conc prinċipali aċidu nitriku. Aktar reaġenti huwa soluzzjoni ta '10% idrossidu tas-sodju jew l-ammonja, is-soluzzjoni ġelatina u phenol mhux ikkonċentrat.

Il-metodoloġija tal-

F'tubu nadif huwa magħmul 1% soluzzjoni proteina bajd -th jew dqiq f'ammont ta '2 ml. Għal dan huwa miżjud madwar 9 qatriet ta 'aċidu nitriku konċentrat għal flokkulazzjoni titwaqqaf. It-taħlita li tirriżulta kien imsaħħan, li jirriżulta preċipitat isfar gradwalment tisparixxi u l-kulur tagħha tmur fil soluzzjoni.

Meta l-likwidu jibred isfel fit-tubu tul il-ħajt miżjud madwar 9 qtar ta ' idrossidu tas-sodju, ikkonċentrat, li huwa żejjed għall-proċess. Il-mezz reazzjoni isir alkalina. Kontenut isir kulur oranġjo fit-tubu tat-test.

karatteristiċi ta '

Peress ksantoproteinovaya imsejħa reazzjoni kwalitattiva għall-aċidu nitriku bl-azzjoni tal-proteini, il-kampjun isir taħt inkluża fume hood. Osserva prekawzjonijiet kollha tas-sigurtà meta jaħdmu ma 'sustanzi kawstika ikkonċentrat.

Ir-rilaxx tal-kontenut mill-tubu jistgħu jseħħu matul il-proċess ta 'tisħin li għandhom jiġu kkunsidrati meta iffissata minn detentur u l-għażla l-inklinazzjoni.

Tisselezzjona 'aċidu nitriku kkonċentrat u soda kawstika għandhom biss bl-użu ta' pipetta tal-ħġieġ u lanġas gomma pipetta pprojbita mill-ħalq.

reazzjoni relattiva ma 'fenol

Għaċ-ċarezza, il-proċess u l-konferma tal-preżenza tal-gruppi fenil titwettaq bi idrossibenżina kampjun simili.

It-tubu li jagħmlu 2 ml ta 'fenol dilwit, imbagħad gradwalment tul il-ħajt, kien miżjud 2 ml ta' aċidu nitriku konċentrat. Is-soluzzjoni kien soġġett għal tisħin, fejn isir isfar. Din ir-reazzjoni hija l-kwalità tal-preżenza taċ-ċirku benżina.

idrossibenżina proċess nitrati bl-aċidu nitriku segwit bil-formazzjoni ta 'taħlita ta' p-nitrophenol u o-nitrophenol, persentaġġ ta '15-35.

test ta 'tqabbil ma' ġelatina

Biex tipprova li r-reazzjoni ksantoproteinovaya mal-proteina jiżvela aċidu amminiku bi struttura aromatiċi, l-użu proteini li ma jkollhomx grupp fenoliċi.

F'tubu nadif huwa magħmul 1% soluzzjoni ġelatina f'ammont ta '2 ml. Għal dan huwa miżjud madwar 9 qatriet ta 'aċidu nitriku konċentrat. It-taħlita li tirriżulta biss jissaħħan. Is-soluzzjoni ma kienx ikkulurit bl-isfar, li juri l-assenza ta 'aċidi amino bi struttura aromatiċi. Kultant ikun hemm sfurija żgħira tal-ambjent minħabba l-preżenza ta 'impuritajiet proteina.

ekwazzjonijiet kimiċi

Fir-reazzjoni żewġ stadji runs ksantoproteinovaya proteini. Formula ewwel proċess nitrati stadju jiddeskrivi amino molekuli ta 'aċidu juŜa l-aëidu nitriku kkonċentrat.

Eżempju huwa it-twaħħil tal-grupp nitro għall-tyrosine biex jiffurmaw nitrotyrosine u dinitrotirozina. Fl-ewwel każ għall-ċirku benżina huwa mehmuż waħda NO ₂ -radical, u t-tieni kompost għandhom żewġ atomi tal-idroġenu għandhom jiġu sostitwiti b'dan NO _2. reazzjoni kimika tyrosine Formula ksantoproteinovaya rappreżentat permezz ta 'reazzjoni bl-aċidu nitriku biex jiffurmaw molekula nitrotyrosine.

proċess nitrati hija akkumpanjata minn transizzjoni kulur bla kulur fit-ton isfar. Fit-twettiq ta din ir-reazzjoni bi proteini li jkun fih l-aċidu amminiku residwi phenylalanine jew tryptophan, u l-kulur tal-bidliet soluzzjoni.

It-tieni pass huwa l-prodott ta 'reazzjoni ta' nitrati ta 'molekuli tyrosine, partikolarment nitrotyrosine, bil ammonju jew idrossidu tas-sodju. Ir-riżultat huwa sodju jew ammonju melħ li fihom il-kulur isfar-oranġjo. Reazzjoni bħal din hija relatata mal-possibbiltà ta 'molekuli nitrotyrosine jimxu fil-forma quinoid. Sussegwentement melħ iffurmat minnha aċidu nitronic, li għandha sistema kinone ta 'bonds doppji konjugat.

Għalhekk truf reazzjoni ksantoproteinovaya mal-proteini. L-ekwazzjoni ppreżentata hawn fuq tieni pass.

riżultati

Waqt l-analiżi ta 'fluwidi li jkunu jinsabu fit-tliet tubi, is-soluzzjoni ta' referenza titħallat bl fenol. Sustanzi b'ċirku benżina jagħtu reazzjoni kwalitattiva bl-aċidu nitriku. Bħala riżultat, bidliet fil-kulur tas-soluzzjoni.

Kif inhu magħruf, il-ġelatina jinkludi forma idrolizzat tal-kollaġini. Il-proteina ma fihiex l-istruttura aromatiċi ta 'l-aċidi amino. Ebda bidla fil-kulur tal-mezz b'reazzjoni ma 'l-aċidu.

Fit-tielet test tube hemm reazzjoni pożittiva għall ksantoproteinovaya proteini. Konklużjoni tista 'tinġibed kif ġej: proteini kollha bi struttura aromatiċi, kemm jekk ikun grupp phenyl jew ċirku indole, minħabba l-bidla fil-kulur tas-soluzzjoni. Dan huwa dovut għall-formazzjoni ta 'komposti nitro ma' kulur isfar.

Twettiq ta reazzjoni kulur jipprova l-preżenza ta 'strutturi kimiċi varji fl-aċidi amino u proteini. ġelatina EŻEMPJU turi li l-kompożizzjoni tiegħu tinkludi l-aċidu aminocarboxylic ma jkollhomx grupp phenyl jew struttura ċikliku.

Bil ksantoproteinovaya reazzjoni tista 'tiġi spjegata mill sfurija tal-ġilda meta applikat għaliha aċidu nitriku qawwija. L-istess kulur se jsiru ħalib frothy matul l-analiżi simili tagħha.

Fil-prattika tal-laboratorju kliniku din kampjun ta 'kulur ma jintużax għall-iskoperta ta' proteina fl-awrina. Dan huwa dovut għall-kulur isfar tal-awrina innifsu.

Reazzjoni Ksantoproteinovaya saret dejjem aktar użati għall-kwantifikazzjoni ta 'aċidi amino bħal triptofan u tyrosine, bħala parti mill-proteini varji.