Metodi mikroskopika fil Mikrobijoloġija

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. metodi ta 'riċerka mikroskopika modi biex jesploraw varjetà ta' oġġetti bl-użu ta 'tagħmir speċjali. Dan jippermetti li jikkunsidraw l-istruttura ta 'sustanzi u organiżmi, il-kobor tagħhom huwa lil hinn mill-limiti tal-riżoluzzjoni tal-għajn tal-bniedem. L-artikolu jagħti analiżi qasira tal-metodi mikroskopiċi.

Ħarsa ġenerali

используют в своей практике разные специалисты. metodi moderni ta 'eżami mikroskopiku li jużaw esperti differenti fil-prattika tagħhom. Fost dawn huma l-viroloġisti, ċitoloġija, ematoloġija, morfoloġija, u oħrajn. Il-metodi ewlenin ta 'l-eżami mikroskopiku huma magħrufa għal żmien twil. L-ewwel huwa mod dawl ta 'tħares lejn oġġetti. Fi snin reċenti, introduċa b'mod attiv fil-prattika, u teknoloġiji oħra. . Għalhekk, il-popolarità ta akkwistat phase-contrast, luminixxenti, interferenza, polarizzazzjoni, infra-aħmar, ultravjola, metodu stereoskopiku ta 'riċerka. Kollha kemm huma bbażati fuq varjetà ta 'proprjetajiet ta' dawl. . Barra minn hekk, użati metodi mikroskopija elettroni. Dawn il-metodi jippermettu l-oġġetti wiri użu ta 'fluss direzzjonali ta' partiċelli ċċarġjati. Għandu jiġi nnutat li dawn il-metodi ta 'studju huma użati mhux biss fil-bijoloġija u l-mediċina. в промышленности. metodu popolari ta 'studju mikroskopika ta' metalli u ligi fl-industrija. Dan jippermetti l-istudju biex tevalwa l-imġiba tal-komposti li jipproduċu teknoloġiji biex jimminimizzaw il-probabbiltà ta 'ksur u saħħa akbar.

modi Dawl: karatteristiċi

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Metodi bħal dawn mikroskopiċi għall-istudju mikroorganiżmi u faċilitajiet oħra bbażati fuq differenti riżoluzzjoni tagħmir. Fattur importanti f'dan huwa l-direzzjoni tal-karatteristiċi raġġ tal-oġġett innifsu. L-aħħar, b'mod partikolari, jista 'jkun trasparenti jew opaki. Skond il-proprjetajiet tal-oġġett, jinbidlu l-proprjetajiet fiżiċi tal-fluss tad-dawl - il-luminożità u kulur minħabba l-amplitudni u l-wavelength, pjan, fażi u direzzjoni ta 'propagazzjoni tal-mewġa. . Dwar l-użu ta 'dawn il-karatteristiċi u jitfasslu metodi mikroskopiċi differenti.

speċifiċità

Biex tistudja l-modi ta 'oġġetti tad-dawl, normalment kulur. Dan jagħmilha possibbli li jiġu identifikati u deskritti f'dawn jew oħrajn proprjetajiet. Huwa meħtieġ li l-tessut ġie ffissat, peress li l-kulur jiżvelaw ċerti strutturi esklussivament ċelloli maqtula. Li jgħixu ċelluli separati żebgħa fil-forma ta 'vacuoles fil-ċitoplasma. Hija ma żebgħa fuq l-istruttura. Iżda ma l-oġġetti ħajjin u jistgħu jiġu investigati bl-użu ta 'mikroskopju tad-dawl. Għal dan il-għan, il-mod vitali ta 'tagħlim. F'każijiet bħal dawn, kondensatur darkfield. Huwa inkorporati fil-mikroskopju dawl.

Jistudjaw oġġetti unpainted

Din titwettaq permezz tal-mikroskopija phase-contrast. Dan il-metodu huwa bbażat fuq il-diffrazzjoni tar-raġġ skond il-karatteristiċi tal-oġġett. Matul l-espożizzjoni immarkat bidla fil-fażi u tal-wavelength. Fil-lenti mikroskopju huwa preżenti pjanċa trasluċidi. Live jew fissi, imma mhux oġġetti miżbugħa minħabba t-trasparenza tagħha, kważi ma bidla fil-kulur, u l-amplitudni tar-raġġ għaddieni permezz tagħhom, li pprovokat biss bidla tal-fażi mewġ. Iżda f'dan il-każ, wara li tgħaddi l-oġġett, il-fluss tad-dawl milwi mill-pjanċa. Bħala riżultat, bejn l-travi, nieqes permezz l-oġġett u li jidħlu fi sfond dawl, id-differenza tul mewġa iseħħ. F'ċertu valur ta 'effett viżwali tagħha iseħħ - l-oġġett dlam se jkun viżibbli b'mod ċar fuq sfond dawl, jew viċi versa (skond il-karatteristiċi ta' pjanċa fażi). Biex tikseb din id-differenza għandha tkun għallinqas 1/4 wavelength.

metodu Anoptralny

Huwa tip ta 'metodu phase-contrast. Metodu Anoptralny jinvolvi l-użu ta 'lenti bi pjanċi speċjali, li jbiddlu biss il-kulur u l-luminożità tad-dawl ambjentali. Dan tespandi ħafna l-possibbiltajiet ta 'studju oġġetti għajxien unstained. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. phase contrast riċerka applikata metodu mikroskopju fil-mikrobijoloġija, parassitoloġija fl-istudju ta 'ċelloli ta' pjanti u annimali, protożoa. Fil-metodu ematoloġija huwa użat biex jiġi kkalkulat u jiddetermina l-differenzjazzjoni ta 'ċelloli tad-demm u tal-mudullun.

tekniki interferenza

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Dawn il-metodi ta 'riċerka mikroskopiċi ġeneralment issolvi l-istess problemi bħall-fażi kuntrast. Madankollu, fil-każ tal-aħħar, l-esperti jista 'josserva biss l-kontorni ta' oġġetti. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Il-metodi interferenza riċerka mikroskopika inessu biex tistudja naħa tagħhom, iwettqu xi elementi ta 'valutazzjoni kwantitattivi. Dan huwa possibbli minħabba l-qsim tar-raġġ tad-dawl. nixxiegħa Wieħed jgħaddi mill-oġġett partiċelli, u l-oħra - billi. Fil-lenti tal-mikroskopju li jilħqu u jinterferixxu. Id-differenza fażi jirriżulta jista 'jiġi determinat mill-piż ta' strutturi ċellulari differenti. Meta l-kejl sekwenzjali huwa bl-predeterminat indiċi refrattiv jistgħu jiġu stabbiliti tessuti ħoxna mhux fissi u l-għan jgħixu, il-kontenut ta 'proteina fih, il-konċentrazzjoni ta' solidi u ilma, u oħrajn. Skond id-ispeċjalisti tad-dejta riċevuti huma kapaċi li jevalwaw b'mod indirett permeabilità tal-membrana, l-attività enzima, il-metaboliżmu taċ-ċelluli.

polarizzazzjoni

Din titwettaq permezz ta 'priżmi Nicol jew Polaroids filmy. Dawn jitpoġġew bejn l-kampjun u s-sors tad-dawl. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Metodu mikroskopija jippolarizza tar-riċerka fl-mikrobijoloġija jippermetti li jistudjaw oġġetti bi proprjetajiet inhomogeneous. Fl-istrutturi isotropika-veloċità tad-propagazzjoni tad-dawl huwa indipendenti mill-pjan magħżula. Fir-rata sistemi anisotropiċi tvarja skond il-dawl orjentati tul il-trasversali jew assi lonġitudinali tal-oġġett. Jekk il-valur indiċi refrattiv tul l-istruttura se tkun akbar mill tul il-trasversali, joħloq rifrazzjoni doppja pożittiv. Dan huwa tipiku ta 'oġġetti bijoloġiċi ħafna li sabu orjentazzjoni molekolari stretti. Dawn kollha huma anisotropiċi. F'din il-kategorija, b'mod partikolari, il-myofibrils, neurofibrils, Cilia fil-epitelju ciliated, fibri kollaġen, u oħrajn.

valur polarizzazzjoni

Paragun tan-natura tar-radjazzjoni u l-indiċi anisotropy refrattiv ta 'l-oġġett jagħmilha possibbli li jiġi stmat l-istruttura molekulari ta' l-organizzazzjoni. Metodu Polarizzazzjoni jservi bħala wieħed mill-metodi ta 'analiżi istoloġiċi użati fil ċitoloġija u oħrajn. Mhux oġġetti miżbugħa biss jistgħu jiġu studjati fid-dawl. metodu Polarizzazzjoni jagħmilha possibbli li jiġu eżaminati unstained u mhux fissi - indiġeni - Preparazzjonijiet ta 'sezzjonijiet ta' tessut.

tekniki fluworexxenti

Dawn huma bbażati fuq il-proprjetajiet ta 'ċerti oġġetti tagħti tiddix fil-porzjon blu-vjola ta' l-ispettru jew UV raġġi. ħafna sustanzi bħal proteini, xi vitamini, coenzymes, drogi, mogħnija bi (mt) luminixxenza primarja. oġġetti oħra jibdew jiddu billi żżid fluorochrome - żebgħa speċjali. Dawn l-addittivi huma selettiv diffuża jew distribwiti fi strutturi ċellulari separati jew komposti kimiċi. Din il-proprjetà kienet il-bażi ta 'l-użu ta' mikroskopija fluworexxenti bil histochemical u studji ċitoloġikali.

Oqsma ta 'użu

Jużaw esperti immuno fluworexxenti jikxfu antiġeni virali u l-konċentrazzjoni tagħhom aġġustata huma identifikati viruses korpi anti u antigens, ormoni, prodotti metaboliċi varji u l-bqija. F'dan ir-rigward, id-dijanjożi ta 'herpes, gattone, epatite B, l-influwenza u infezzjonijiet oħra jużaw metodi fluworexxenti ta' materjali riċerka. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Metodu immuno-fluworexxenti mikroskopika jiskopri malinn tumur, jiddeterminaw l-oqsma iskemiċi tal-qalb fl-istadji bikrija ta 'attakk tal-qalb u l-bqija.

L-użu ta 'dawl ultravjola

Hija bbażata fuq il-ħila ta 'numru ta' sustanzi li jgħixu ċelluli jew mikro-organiżmi huma ffissati, iżda uncolored trasparenti taħt drappijiet ħfief viżibbli jassorbu raġġi UV ta 'wavelength speċifiku. Dan huwa minnu b'mod partikolari għall-komposti għolja molekulari. Dawn jinkludu proteini, aċidi aromatiċi (methylalanine, tryptophan, tyrosine, eċċ), aċidi nuklejċi u bażijiet purini piramidinovye u l-bqija. mikroskopija UV tippermetti li jispeċifika l-lokalità u numru ta 'dawn il-komposti. Fl-istudju ta 'affarijiet ħajjin professjonisti jista' josserva l-bidliet fil-proċessi metaboliċi tagħhom.

addizzjonalment

mikroskopija infra-aħmar huwa użat fl-istudju huma opak għad-dawl u raġġi ultravjola bl-assorbiment tal-oġġetti fluss istrutturi li wavelength 750-1200 nm. Biex tapplika dan il-metodu m'hemmx bżonn għall-pre-jesponu l-mediċini għat-trattament kimiku. Tipikament, il-metodu IR huwa użat fil-antropoloġija, żooloġija u xjenzi oħra industrija. Fir-rigward mediċina, dan il-metodu huwa użat prinċipalment fl-oftalmoloġija u Neuromorphology. L-oġġetti-istudju dimensjonali bl-użu ta 'mikroskopju stereoskopiku. hardware disinn jippermetti monitoraġġ tal-għajn tax-xellug u tal-lemin f'angolu differenti. oġġetti opaki jiġu investigati f'ingrandiment relattivament baxx (120 darba mhux aktar). Metodi stereoskopiku huma użati fil microsurgery, Pathomorphology fil-mediċina forensika.

elettroni mikroskopija

Huwa użat biex tistudja l-istruttura ta 'ċelluli u tessuti fil-livelli makromolekolari u subcellular. Elettroni mikroskopija ħallietna nsiru biex jagħmlu qabża kwalitattiva fil-qasam tar-riċerka. Dan il-metodu huwa użat ħafna fil-bijokimika, onkoloġija, viroloġija, morfoloġija, immunoloġija, il-ġenetika, u oqsma oħra. titjib sinifikanti tar-riżoluzzjoni pprovduta mill-fluss kapaċità tagħmir ta 'elettroni li jgħaddu mill-kamp elettromanjetiku vakwu. L-aħħar, imbagħad, joħolqu lentijiet speċjali. Elettroni huma kapaċi li jgħaddu mill-istruttura tal-oġġett jew rifless minnhom b'devjazzjonijiet minn angoli differenti. Ir-riżultat huwa muri fuq l-iskrin fluworexxenti tal-apparat. Jekk mikroskopija trasmissjoni ħsieb planari miksuba meta iskannjar rispettivament jdawru.

prerekwiżiti

Ta 'min jinnota li qabel l-pass eżami mikroskopiku elettroniku, l-oġġett huwa soġġett għal taħriġ speċjali. B'mod partikolari, l-użu ta 'fissazzjoni fiżika jew kimika ta' tessuti u organiżmi. materjal sezzjonali bijopsija u, barra minn hekk, dewatered, huwa inkorporat fil resin epossidiku, maqtugħin ħġieġ jew djamant skieken fuq sezzjonijiet ultrathin. Allura l-kuntrast tagħhom u studju. Il-mikroskopju scanning teżamina l-wiċċ ta 'oġġetti. Biex tagħmel dan, huma sprejjat sustanza speċjali fil-kamra tal-vakum.